2. Зберігання чистих культур продуцентів фп і розмноження засівного матеріалу

Для отримання засівного матеріалу використовують вихідний штам чистої культури (ЧК) продуценту із колекції промислових мікроорганізмів або з лабораторії самого заводу. Важливою є задача їх зберігання у чистому і активному стані. Найбільш поширеним способом є пересіви культури з інтервалом в 1-3 місяці в свіжі пробірки з оптимальним для кожного продуценту складом агаризованого середовища, які зберігають в холодильнику при 3-4°С.

Більш тривалий час культури можна зберігати під шаром стерильного вазелінового масла медичного призначення (6-12 місяців), при температурах від -10 до -15°С (1-1,5 роки), в ліофілізованому стані (5-6 років і більше).

Підготовка посівного матеріалу для поверхневого культивування

Цей спосіб застосовують в основному для культивування мікроскопічних грибів. Посівний матеріал може бути приготовлений двома способами:

1. культура, що вирощена на твердому поживному середовищі;

2. міцеліальна маса мікроорганізмів, вирощена на рідкому середовищі глибинним способом.

Незалежно від виду посівного матеріалу черговість операцій однакова:

1) приготування поживного середовища;

2) стерилізація середовища і апаратури;

3) охолодження середовища з дотриманням правил асептики до температури вирощування конкретного продуценту;

4) засів середовища вихідним штамом;

5) вирощування культури продуценту до певного віку;

6) консервування посівного матеріалу.

Посівну культуру на твердому поживному середовищі готують, вирощуючи мікроорганізми у все зростаючому об'ємі в три або чотири стадії: пробірка → колби → кювети. З кювет посівний матеріал поміщають в стерильні пакети, які зберігають в холодильних камерах при 3-4°С не більше, як 4 доби (щоб не розмножати культуру щодоби, починаючи з лабораторії). Культура повинна містити не менше 0,7 млрд. спор в 1 г, проростати мають не менше, ніж 86-90 % спор; не повинно бути сторонньої мікрофлори. Культуру, яка відповідає всім вимогам, змішують із стерильною водою і невеликою кількістю поверхнево-активної речовини (для кращого змочування спор). Така суспензія і є готовим посівним матеріалом.

Підготовка посівного матеріалу для глибинного культивування

Посівний матеріал готують також глибинним способом в кілька етапів:

1) обновлення (“омолодження”) вихідної культури на агаризованому середовищі;

2) вирощування продуценту в колбах на качалках;

3) розмноження продуценту в інокуляторах.

Засівна доза при глибинному культивуванні досить значна - від 1 до 15 %. Тому число стадій і об’єм інокуляторів визначається тільки потужністю підприємства і оптимальною нормою засіву даного продуценту.

Засівний матеріал вважається активним, якщо він забезпечує нормальну тривалість виробничого культивування і досягнення максимального накопичення ферментів при цьому. Він не повинен містити сторонньої мікрофлори.