4.5. Поверхневе культивування для одержання ферментів (початок).

Вплив вологостi твердого поживного середовища на бiосинтез ферментiв. Для поверхневого способу культивування продуцентiв ферментiв ступiнь зволоження твердого поживного середовища має велике значення. За низької вологостi мiкроорганiзми не можуть використовувати поживнi речовини середовища, оскільки дифузiя останнiх ускладнена, що призводить до сповiльнення росту, бiосинтезу ферментiв та інтенсивного спороутворення. Надмiрне зволоження порушує крихку структуру середовища, знижує його повiтропроникливiсть, що також призводить до сповiльнення росту i зниження бiосинтезу ферментiв.

Оптимальна вологiсть твердого поживного середовища для бiосинтезу ферментiв залежить вiд фiзiологiчних властивостей продуценту, складу поживного середовища i зазвичай повинна бути в межах 65 – 70 %.

На першому занятті готують поживне середовище заданого складу i вологостi, стерилiзують середовище, контролюють посiвний матерiал, зволожують середовище i засiвають, розкладають засiяне середовище в кювети i ставлять кювети для вирощування.

На другому заняттi аналiзують готову культуру, визначають оцукрювальну або амiлолiтичну активнiсть, вологiсть готової культури i вихiд.

Спiвробiтники кафедри готують посiвний матерiал i стерилiзують посуд. За 7 днiв до початку заняття пересiвають продуцент A. оryzae 740-А2 iз музейної пробiрки на свiжоскошений сусло-агар у пробiрки. Пробiрки вмiщують у термостат iз температурою 30 ºС на 3 – 4 доби. Потiм 1 мл суспензiї спор (10 мл стерильної води на пробiрку) засiвають стерильне тверде поживне середовище (15 г пшеничних висівок вологiстю 45 % у колбах місткістю 250 мл), добре перемiшують i ставлять для вирощування у термостат з температурою 30 ºС на 2 - 3 доби. Культура в колбах є вихiдним посiвним матерiалом. Попередньо також стерилiзують кювети для вирощування, посуд для засiву i зволоження середовища, мiрнi цилiндри, колби з водопровiдною водою, склянi палички для перемiшування при температурi 120 ºС протягом 30 хв.